贝科新肽(查看)-湖北白黎芦醇大肠杆菌表达方法
武汉贝科新肽科技有限公司
- 主营产品:原位杂交,亚细胞定位,蛋白互作,启动子筛选
- 公司地址:湖北省武汉市洪山区关山大道289号紫菘逸景华庭二期109栋2层2002-3号
咨询热线: 15002786799
立即咨询
QQ咨询
信息详情
白藜芦醇的生物合成主要有两种途径:苯丙烷途径和苯甲酸途径。苯丙烷途径:这是白藜芦醇生物合成的主要途径。起始物为苯丙氨酸,经过一系列酶的催化作用,如苯丙氨酸首先被苯丙氨酸氨基转移酶(PAL)催化转化为酸,然后经过酸羧化酶(C4H)和另一种酶的作用,终生成白藜芦醇。苯甲酸途径:起始物为苯甲酸,经羟化酶的催化作用,生成对羟基。对羟基进一步被特定的酶催化,终生成白藜芦醇。
白藜芦醇在大肠杆菌中的表达方法主要涉及到基因工程技术和代谢工程技术的应用。以下是基本步骤:基因克’隆:首先,从已知能合成白藜芦醇的植物(如葡萄、花生等)中克’隆出与白藜芦醇合成相关的关键酶基因,如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉’桂酸-4-羟化酶(C4H)、4-香豆酸:CoA连接酶(4CL)和芪合酶(STS)等。构建表达载体:将这些关键酶基因插入到适合大肠杆菌表达的载体中,如pET、pBAD等,并添加适当的启动子和终止子,以确保基因在大肠杆菌中能够正确表达。
白藜芦醇并不是大肠杆菌表达系统中常用的表达产物。大肠杆菌表达系统主要用于生产各种外源蛋白,这些蛋白可能是人类或其他生物的蛋白质,具有各种生物功能。
然而,近年来,由于白藜芦醇的多种生物活性,如抗’氧化、抗’炎、抗’癌等,人们开始尝试通过基因工程手段在大肠杆菌中表达白藜芦醇合成途径中的关键酶基因,以期望提高白藜芦醇的产量。这种策略被称为代谢工程或合成生物学。